本产品适用于人间充质干细胞、人造血干细胞和祖细胞。与含二甲基亚砜(DMSO)的溶液相比,复苏后细胞活率相当。可在整个冻存过程中保持干细胞的潜能,消除MSC和HSPC应用中含DMSO的风险。
◆特点
● 不含动物成分、不含DMSO、化学成分明确
● 可在-80 °C~-196 °C环境下保存细胞
● 在cGMP条件下生产
● 药物主文件(DMF)注册
◆较高的复苏后细胞密度和活率
图1. 与含DMSO的溶液相比,PRIME-XV MSC FreezIS DMSO-Free在冻存后保留了相当的MSC活细胞密度和活率。
人脂肪源性MSC在PRIME-XV MSC FreezIS DMSO-Free和PRIME-XV FreezIS中冻存。将细胞在液氮中储存两天,然后复苏并通过两次传代培养,直至80%汇合。在复苏和复苏后两次传代时,在Vi-CELL活细胞分析仪中用台盼蓝染色评估活细胞密度(A)和活率(B)。使用细胞计数乘以体积计算活细胞密度。
图2. PRIME-XV Stem FreezIS DMSO-Free 在复苏和多次传代后保留了MSC形态和标记物表达。
明场图像显示解冻后典型的 MSC 形态 (A)。人AD-MSC在复苏后培养3代,并通过流式细胞术进行分析。扩增的细胞保留了特征性的MSC标记表达:CD105和CD90呈阳性,并且CD45呈阴性(B)。
图3. 在 PRIME-XV Stem FreezIS DMSO-Free 中冻存的细胞保留分化潜能。
将复苏后的细胞培养三代,随后用PRIME-XV分化培养基分化为成骨细胞(A)、脂肪细胞(B)和软骨细胞(C)。骨钙素(绿色)和RUNX2(红色)染色显示存在骨细胞(A)。使用抗FABP-4 抗体(红色)的免疫细胞化学显示分化为脂肪生成谱系(B)。可以在冷冻切片第 20 天的球体中检测到聚集蛋白聚糖(红色)和 II型胶原蛋白(绿色),证明软骨细胞外基质的表达。
注:本页面所刊载的内容和数据均来自富士胶片欧文科技