※ 本产品基于理化学研究所开拓研究本部田中生体机能合成化学实验室的研究成果商品化而成。
◆特点
◆应用
※ 不可用于丙烯醛的局部观察。
◆操作方法概要
1. 使用新鲜的培养基制备AcroleinRED溶液（终浓度10~30 μM）。
※ 终浓度可能会因为细胞种类不同而有所差别，建议根据实验进行优化。
2. 去除培养细胞的培养基，用PBS清洗2次。
3. 添加含有AcroleinRED的培养基。
4. 培养30 min~1 h。
※ 注意：荧光信号会随处理时间的增加而积累。请根据实验选择理想的处理时长。
5. 用PBS清洗细胞3次，更换新的培养基。
6. 可以观察非固定细胞（活细胞）及固定细胞。
◆应用实例
验证苯基叠氮化合物的丙烯醛特异性
依赖于氧化应激的丙烯醛的产生量增加
在氧化应激模型中，将0~1,000 μM的各浓度的过氧化氢H2O2添加至HUVEC细胞中预孵育2 h后，添加AcroleinRED并在30 min后进行非固定观察。在未添加H2O2时可观察到稳态下丙烯醛的产生量。另外，可以发现随着H2O2浓度的增加，丙烯醛的生成量也不断增加。
ROS产生促进剂使丙烯醛产生量增加
使用能促进细胞内活性氧（ROS）产生的物质甲萘醌对细胞处理0、10、30、60 min后，分别使用ROS检测试剂以及AcroleinRED进行共染色。可观察到经甲萘醌处理后，细胞的ROS迅速增加，而丙烯醛则是缓慢增加。
不同细胞种类所产生的丙烯醛产生量比较
使用AcroleinRED对3种正常细胞以及8种人癌细胞株进行丙烯醛产生量的相对比较。结果表明，与正常细胞相比，癌细胞中丙烯醛的产生量明显增加。并且发现每种癌细胞的丙烯醛的产生量之间也有差别。
组织中丙烯醛的可视化
将乳腺癌患者来源乳腺组织（IDC，浸润性导管癌，DCIS，原位导管癌）以及正常乳腺组织（NBG）提取后立刻以非固定状态浸于AcroleinRED（20 μM）/Hochest混合溶液中，静置5分钟后染色丙烯醛和细胞核，清洗组织后使用荧光显微镜观察。
结果表明，AcroleinRED处理过的乳腺癌组织（IDC，DCIS）中可以观察到红色荧光，但正常乳腺癌组织（NBG）却基本无法观察到经过AcroleinRED处理的染色。通过这种方法，可以对非固定状态下的提取组织进行染色。
◆原著论文
●A. R. Pradipta, M. Taichi, I. Nakase, E. Saigitbatalova, A. Kurbangalieva, S. Kitazume, N. Taniguchi, K. Tanaka, ACS Sens., 1, 623～632 (2016).
Uncatalyzed Click Reaction between Phenyl Azides and Acrolein: 4-Formyl-1,2,3-Triazolines as“Clicked” Markers for Visualizations of Extracellular Acrolein Released from Oxidatively Stressed Cells.
●T. Tanei, A. R. Pradipta, K. Morimoto, M. Fujii, M. Arata, A. Ito, M. Yoshida, E. Saigitbatalova, A. Kurbangalieva, J. Ikeda, E. Morii, S. Noguchi, and K. Tanaka, Adv. Sci., 1801479 (2018)
Cascade reaction in human live tissue allows clinically applicable diagnosis of breast cancer morphology.
◆产品列表
