本产品是可在短时间内提取哺乳动物组织以及细胞内的线粒体DNA(mtDNA)的试剂盒。此外,还可用于从复合饲料中提取mtDNA。

 

◆特点

● 只需少量组织样品(5 mg),即可提取适用于 PCR 反应的 mtDNA。

● 从 50 mg组织( 250 mg 骨骼肌) 中提取的mtDNA可通过琼脂糖凝胶电泳确认。

● 所提取的mtDNA纯度高,后续可用于PCR和限制性内切酶酶切分析。

● 可从冷冻组织中提取mtDNA。

● 无需添加如苯酚、氯仿等有机溶剂。

 

◆原理

1. 通过离心从细胞裂解液中获得线粒体断片。

2. 为除去线粒体断片中的基因组DNA,本试剂盒采用质粒DNA纯化中的碱-SDS方法,通过使基因组DNA碱发生变性并沉淀析出后,回收mtDNA(环状DNA)。

3. 使用碘化钠令混入的蛋白质等变为可溶性物质,再通过洗涤缓冲液纯化mtDNA。

 

◆试剂盒组成

1. Buffer for Homogenate(匀浆缓冲液)

2. DNA Extraction Solution 1

3. DNA Extraction Solution 2(A)

4. DNA Extraction Solution 2(B)

5. DNA Extraction Solution 3

6. 碘化钠溶液

7. 洗涤液

 

◆实验流程

 

◆实验示例

从小鼠的新鲜组织以及冷冻组织中提取mtDNA

从小鼠的新鲜组织中提取的mtDNA,取其中一半用Pst l处理,通过琼脂糖凝胶电泳进行确认。

 

从小鼠的冷冻组织中提取的mtDNA,取其中一半用Pst l处理,通过琼脂糖凝胶电泳进行确认。

 

◆使用过程中的注意事项

由于使用本试剂盒提取的mtDNA量较少,因此需要通过GelRed™染色才能在凝胶上被检测出来。本试剂盒无法用于溴化乙锭染色检测。

◆产品列表

※ 仅供实验研究用,不可用于临床诊断。